OmicsLink™ shRNA表达克隆

发布时间：2025-03-14 热度：344

产品介绍

GeneCopoeia提供病毒和非病毒载体的人、小鼠和大鼠全基因组OmicsLink™ shRNA表达克隆，shRNA序列经专利算法设计包括茎

（19-29对核苷酸）和环，确保高效的抑制作用和最低的脱靶效应。

shRNA抑制效率保证

对于构建到慢病毒和哺乳动物载体的shRNA克隆，我们针对每个基因提供3个克隆，在靶细胞的转染效率达到85%以上的情况下，

保证至少有1个克隆通过qRT-PCR检测对靶基因的表达抑制水平达到70%以上。

靶向任意细胞

使用慢病毒和非病毒载体系统，既可以转染或转导shRNA进入常规的分裂细胞，也可以进入难转染的非分裂细胞，如原代细胞、

神经元细胞等。

灵活的载体选择

每个shRNA克隆提供5 µg纯化质粒，也提供客户定制的慢病毒载体的shRNA克隆。定制该克隆，请填写表格。

标签及报告基因

载体中带有的mCherry和eGFP报告基因可以用于监测转染和转导效率，嘌呤霉素标记可用于稳定细胞系的筛选。

全长测序的表达框架

载体的插入序列已经过测序，包括启动子、编码shRNA的正义和反义链、发夹结构、终止子和其他接头序列。

产品应用

基因表达下调 — 以包含无义序列的克隆为对照，研究shRNA克隆对单个基因表达的下调效果。在每个shRNA克隆订单中赠送

对照克隆。

信号通路研究 — 我们将克隆按照不同的信号传导、代谢、疾病通路、基因家族等进行了分类，并将已知同一通路的shRNA表达

克隆以96孔或384孔板的形式排列在一起，可一次研究一组基因在某一信号通路中的功能。目前我们提供针对人类全部激酶基因

的shRNA表达克隆，并已按照按不同激酶的功能进行了分类。

靶点及功能验证 — OmicsLink™ ORF表达克隆和在shRNA靶序列带有沉默突变的ORF表达克隆一起使用可用于shRNA靶点验证

和基因功能拯救研究。

shRNA表达克隆对基因表达抑制效应的检测方法

qRT-PCR — shRNA克隆的表达能导致靶标基因所转录的mRNA被切割和降解，从而降低蛋白的表达量。所以推荐检测表达抑制

效率的第一步是qRT-PCR。GeneCopeia提供验证过的对应靶标基因和其他已报导的转录本的qRT-PCR引物。

Western Blot检测 — 大部分情况下，检测shRNA对基因表达的抑制效率需要用Western Blot方法来检测蛋白表达水平。

功能检测 — 检测表达抑制效率还可用生物和生化的终点分析方法，如细胞增殖、克隆形成、细胞周期、细胞迁移等。

报告基因检测表达水平 — 当研究的靶标基因内源转录水平很低，且不适宜使用qRT-PCR和WB检测时，表达抑制效率的检测也

可通过共转导shRNA克隆和一个含靶标基因并带了报告基因的表达克隆，检测报告基因的表达水平即可。靶基因的mRNA遭s

hRNA的破坏，同时导致了报告基因的mRNA遭破坏，从而表现为报告蛋白的表达量下降。因而表达抑制效率可以用报告蛋白

的酶活性分析结果来进行量化。