人类 AAVS1 safe harbor 基因敲入试剂盒及克隆

发布时间：2023-08-11 热度：394

介绍

人类第19号染色体上的 AAVS1（又名为 PPP1R2C 位点）是一个经过验证、能确保转入 DNA 片段预期功能的“安全港”位点。该位点是一个开放的染色体结构，能保证转入基因能被正常转录。另外很重要的一点是在该位点插入外源基因片段对细胞无已知的副作用。

靶向 AAVS1 位点的 TAL·EN 或 CRISPR-Cas9 体系能特异剪切人类第19号染色体上的 AAVS1 位点，生成DNA双链断裂（DSB），触发DNA的自然修复机制，诱导位点与 AAVS1 供体 DNA 克隆之间发生同源重组（HR），将供体克隆上的 DNA 片段整合到基因组上的 safe harbor 位点。

Genome-TALER™ 人类 AAVS1 Safe Harbor 基因敲入试剂盒

试剂盒专为转基因实验设计，能通过 TALEN 介导的同源重组将您感兴趣的基因、筛选标记或其他遗传因子转入位于人类第19号染色体上的AAVS1 safe harbor位点。 试剂盒包含一对 AAVS1 TALEN 质粒，一个 AAVS1 供体载体或一个供体克隆质粒*，一个阳性对照供体克隆质粒以及两对基因敲入PCR 验证引物组合。

图1. Genome-TALER™ 人类 AAVS1 safe harbor 基因敲入试剂盒。该试剂盒包含(A) 和 (B) 。(A) AAVS1 TALEN 及供体 DNA 质粒；(B) AAVS1 基因敲入验证 PCR 引物组合。

GeneHero™ 人类 AAVS1 Safe Harbor 基因敲入试剂盒

试剂盒专为转基因实验设计，能通过 CRISPR-Cas9 介导的同源重组将您感兴趣的基因、筛选标记或其他遗传因子转入位于人类第19号染色体上的AAVS1 safe harbor位点。 试剂盒包含1个 AAVS1 sgRNA/Cas9 表达克隆，1个 AAVS1 供体克隆载体或供体克隆*，1个阳性对照供体克隆及两对基因敲入PCR 验证引物组合。

图3. GeneHero™ 人类 AAVS1 safe harbor 基因敲入试剂盒。该试剂盒包含(A) 和 (B) 。(A) AAVS1 sgRNA/Cas9 表达克隆及供体DNA质粒；(B) AAVS1 基因敲入验证PCR引物组合。

人类 AAVS1 Safe Harbor ORF 敲入克隆

人类 AAVS1 Safe Harbor ORF 敲入克隆是装载客户感兴趣的基因 ORF 的 AAVS1 供体克隆。该供体克隆可搭配 Genome-TALER™ 或 GeneHero™ 人类 AAVS1 Safe Harbor 基因敲入试剂盒使用，将客户感兴趣的 ORF 特异敲入位于人类第19号染色体上的 AAVS1 位点。试剂盒中的 TALEN 或 CRISPR-Cas9 体系靶向剪切 AAVS1 位点， 产生 DNA 双链断裂（DSB），使该位点发生同源重组（HR）。目前这一系列敲入克隆有超过20,000条序列确证的人类 OFR 可供选择。

图4. 人类 AAVS1 Safe Harbor ORF 敲入克隆质粒图谱

AAVS1 供体克隆客户定制服务 

GeneCopoeia 也提供 AAVS1 供体克隆客户定制服务，为客户构建含有突变基因或其他遗传因子的敲入克隆，用于针对 AAVS1 位点的基因敲入实验。