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西安依科分享外泌体解决方案

Exosome Solutions外泌体(Exosome)是由细胞分泌而来的微小囊泡,直径约为 30-150 nm,天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和细胞培养基等生物体液中,几乎所有类型的细胞都可以产生并释放外泌体[1]。目前,外泌体因其在细胞间通讯中的作用而被广泛地认识到,比如将不同生物分子(包括蛋白质、RNA和脂..

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西安依科分享外泌体解决方案

发布时间:2023-02-01 热度:920

Exosome Solutions

    外泌体(Exosome)是由细胞分泌而来的微小囊泡,直径约为 30-150 nm,天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和细胞培养基等生物体液中,几乎所有类型的细胞都可以产生并释放外泌体[1]。目前,外泌体因其在细胞间通讯中的作用而被广泛地认识到,比如将不同生物分子(包括蛋白质、RNA和脂质)从一个细胞传递到另一个细胞[2]。越来越多的研究者开始对外泌体作为生物标志物在临床的应用、以及它的治疗用途进行研究和探索。Genecopoeia将为您的外泌体研究提供高质量的产品和服务。

外泌体提取试剂盒 New!

GeneCopoeia提供的ExoSureExosome Isolation Kit 结合沉淀法和尺寸排阻色谱(SEC)技术,能够*大限度地提高外泌体的纯度和产量。纯化后的外泌体可用于电子显微镜分析、纳米粒子跟踪 (NTA) 分析、核酸和蛋白质分析、体内和体外实验等。 

产品优势

产量高:每纯化柱可获得高达5 x 1010的纯化外泌体,产量与细胞类型和培养条件有关。

品质高:基于尺寸排阻色谱(SEC)方法,利于保留胞外囊泡(EVs)的原始形态和生物学功能。

效率高:实际操作时间低于20分钟。

应用广:纯化后的外泌体可用于电子显微镜分析、纳米粒子跟踪 (NTA) 分析、核酸和蛋白质分析、体内和体外实验等。

性能

使用ExoSure™试剂盒得到产量高、纯度高的外泌体

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1. NTA分析ExoSure™分离的HEK293T细胞外泌体。(A) 使用ExoSure™ Solution (Cat. No. EP001) ,得到粗提的HEK293T细胞外泌体的大小和颗粒浓度分布图。D90值为400nm,峰值在101 nm处。(B) 使用ExoSure™ Exosome Isolation Kit (Cat. No. EP002) ,得到纯化的HEK293T细胞外泌体的大小和颗粒浓度分布图,D90值为283nm,峰值在90 nm处。

外泌体标志蛋白WB检测

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2. CD63外泌体标志蛋白的WB检测。分别用ExoSure™外泌体提取试剂盒EP001EP002提取HEK293T细胞培养上清中的外泌体。提取的外泌体进行BCA蛋白定量后,分别检测CD63GAPDH的表达情况,上样量分别为10μg(蓝色)5ug(橙色)HEK293T组为细胞裂解液对照。

ExoSure™ vs 竞品试剂盒

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3. 荧光素酶活性测定。分别使用ExoSure™ Exosome Isolation Kit System Biosciences (SBI) ExoQuick-TC® ULTRA EV Isolation Kit从转染荧光素酶-CD63质粒的HEK293T细胞中分离外泌体。使用Gaussia Luciferase Assay Kit (GeneCopoeia, Cat. No. LF061)检测外泌体的荧光素酶活性。

产品订购信息

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外泌体标记相关预制慢病毒

Genecopoeia提供携带不同标记(tdTomato, mCherry-Flag, Flag-Gluc)的外泌体标志物CD9, CD63CD81的预制慢病毒(图一)。可用于示踪外泌体的形成、分泌、靶向和运输机制[3,4,5]。另外,Genecopoeia还提供可用于动物活体实验研究的外泌体预制慢病毒。

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图一. 外泌体示意图(Ibrahim A, Marbán E. Annual Review of Physiology, 2016

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1: CD63外泌体标志物蛋白印迹。在293T细胞中分别表达A, B, C, D质粒。阳性质粒是Flag-EGFP。蛋白印迹样品均来源于293T细胞上清并经过纯化。左图使用1:1000 anti-CD63 抗体和1:5000 anti-mouse IgG抗体进行检测,右图使用1:1000 anti-Flag抗体和1: 5000 anti-mouse IgG抗体进行检测。相关蛋白的预期大小分别为:Flag: 24 kDa, Gluc: 18 kDa, Nluc: 19 kDa, mCherry: 26 kDa, CD63: 53 kDa, Flag-Gluc-CD63: 73 kDa, Flag-mCherry-CD63: 81 kDa

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2:FACS分析被标记的外泌体的细胞培养实验。在HEK293T细胞系中表达CD63-tdTomato和CD81-tdTomato融合蛋白。从细胞上清液中分离外泌体,用于细胞培养实验。将新铺板的HEK293T细胞(未处理)与分离的外泌体一起孵育6小时,然后进行FACS分选分析。

外泌体预制慢病毒

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外泌体裂解直接RT-qPCR试剂盒 New!

Genecopoeia提供一种无需提取外泌体RNA即可直接对外泌体进行不同基因表达水平的定量检测体系。ExoCtFirst-Strand cDNA Synthesis KitExoCtRT-for-AllBufferExoCtPAP/RTase Mix组成,可在同一反应管内对外泌体中的多种RNA模板(包括miRNA, mRNA, LncRNA)同时进行逆转录反应。

产品优势

经文献筛选:从大量外泌体相关研究的文献中筛选得到的与外泌体相关性较高的miRNAs

灵敏度高:可对检测低至20 pgTotal RNA(或者低至10 pgsmall RNA

特异性好:能够区分单核苷酸错配的miRNAs。每套引物都经过了实验验证,以便进行特定的扩增。

重复性高:阵列间具有高重复性(R2>0.99)。

已验证的miRNA引物:每条miRNA特异验证引物均使用专利算法设计并经过实验确证

外泌体预制miRNA检测阵列

     外泌体是存在于循环中的纳米小泡,参与细胞之间的通讯和调节不同的生物过程。miRNAs是外泌体转运的重要组成部分,可作为潜在的生物标志物[6]。在不同细胞微环境刺激下,细胞能主动、特异地将miRNAs包裹,并通过外泌体的形式分泌到细胞外环境以响应不同的刺激,外泌体miRNAs转移到受体细胞以调节靶基因的表达[7]。外泌体miRNAs不仅有助于了解肿瘤发生的生物学机制,而且有助于进一步探索治疗途径[8]。      Genecopoeia通过对发表文献的全面检索,精心筛选miRNA与外泌体之间的密切关系,提供用于分析与外泌体相关的miRNA表达的miprofileexosome miRNA qPCR阵列。miProfile™外泌体miRNA阵列可以帮助研究人员分析不同样本(尿液[9,10]、血液[11,12]或牛奶)和各种癌症(如肺癌[13,14]、结直肠癌[15]、乳腺癌[16]、前列腺癌[17]等)的外源体中miRNA的差异表达,从而了解miRNA在不同细胞间相互通讯中的作用。


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