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猪肾细胞

猪肾细胞

英文名称:PK-15

产品货号:U10001

产品规格:25T

所属品牌:UBI

产品报价:¥1580

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细胞名称 PK-15 猪肾细胞 货号 U10001 种属 猪 细胞来源 ATCC/中科院/协和医院等地引进 生长特性 贴壁、上皮细胞样 培养条件 培养基:90% MEM +10% FBS ,推荐使用UBI的特级胎牛血清(U11-059A) 温度:37℃ 气相:95%空气,5%二氧化碳 保存 冻存条件:80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO(备注:建议使用UBI的Cell Freezing Medium无血清冻存液(U80-025C),用4度保存的冷冻液直接重悬细胞,不能预热后使用。) 保存条件:液氮存储 供应限制 仅供科研使用 传 代 1. 用 75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行 1-3 小时的缓冲,. 然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入 5-6mL 新鲜 培养基(以 T25 培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基 颜色变化对其进行换液以及传代,一般 2 到 3 天换一次液; 2.待细胞到达汇合点时,需要对其进行传代,传代比例为 1:5 至 1:7; 3. 传代步骤:将 0.25%胰酶-0.53 mM EDTA 消化液置于 37°预热,倒掉培养瓶中的培 养基,往培养瓶中加入 3-5 ml PBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加 1-2 ml 预热好的胰 酶,置于 37°孵育消化(**次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细 胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为*佳消化时间,记录*佳消化时间,以便 于下次消化),消化好后加入 3ml 完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上 的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,270g 离心 5min,弃上清,加入完全 培养基重悬细胞,进行传代 常见问题及解决方案 1.培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。 2.收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基,请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清(原瓶培养基的继续使用时间*长不宜超过 72 小时) 3.细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留8-10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。

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