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细胞名称
NAMALWA 人burkitts淋巴瘤细胞(通过STR鉴定)
货号
U80239
种属
人
细胞来源
从ATCC/中科院/协和医院等地引进
生长特性
悬浮
培养条件
培养基:RPMI-1640 (含 2mM L-谷氨酰胺,1.5g/L 碳酸氢钠,4.5g/L 葡萄糖,10mM HEPES, 1mM 丙酮酸钠)92.5% +7.5% FBS,推荐使用UBI的特级胎牛血清(U11-059A)
温度:37℃ 气相:95%空气,5%二氧化碳
传代
1. 用 75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行 1-3 小时的缓冲, 然后置于无菌操作台,打开瓶口,将旧培养基更换成 5-6mL 新鲜培养基(以 T25 培 养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行 换液以及传代,一般 2 到 3 天换一次液加入原培养基 20%-30%体积的新鲜培养基;
2. 待细胞生长至 2*106 个/mL 时,需要对其进行传代,传代比例为 1:4;
3. 传代步骤:吸取悬浮细胞培养液,移至离心管,1200rpm 离心 3min,弃去上清, 加入新鲜培养基,按 5*105 个/mL 的密度进行传代。
保存
冻存条件:85%完全培养基+10%FBS+5%DMSO
(备注:建议使用UBI的Cell Freezing Medium无血清冻存液(U80-025C),用4度保存的冷冻液直接重悬细胞,不能预热后使用。)
保存条件:液氮存储
供应限制
经供研究之用
常见问题及解决方案
1.培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。
2.收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基,请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清(原瓶培养基的继续使用时间*长不宜超过 72 小时)
3.细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留8-10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。