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细胞名称 Raw264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞 货号 U30018 种属 小鼠 细胞来源 ATCC/中科院/协和医院等地引进 生长特性 贴壁 单核细胞样 传 代 1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代； 2.待细胞长满瓶底面积70%，已有部分细胞开始堆叠时，需要对其进行传代，传代比例为1:3至1：6； 3.传代步骤：去掉旧培养基后，使用细胞刮将细胞刮下，再加入培养基重悬传代。或去掉旧培养基后，加入冷PBS或培养基对细胞进行吹打将其从瓶底分离。吹打次数不宜过多，以免造成细胞损伤。若悬浮细胞较多，可直接用旧培养基吹打细胞，吹打完成后吸出培养基，1000r/min离心5min，去上清后加入新鲜培养基重悬传代。 培养条件 培养基：90%DMEM+10%FBS，推荐使用UBI的特级胎牛血清（U11-059A） 温度：37℃ 气相：95%空气，5%二氧化碳 保存 冻存条件：80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO(备注：建议使用UBI的Cell Freezing Medium无血清冻存液（U80-025C），用4度保存的冷冻液直接重悬细胞，不能预热后使用。) 保存条件：液氮存储 供应限制 仅供研究之用 常见问题及解决方案 1.培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。 2.收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间*长不宜超过 72 小时） 3.细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留8-10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。